## 激活T细胞的信号传导通路
T淋巴细胞的活化是免疫应答的核心,主要由双信号机制调控。第一个信号是特异性抗原识别信号,这一过程涉及抗原呈递细胞(APC)表面的MHC-抗原肽复合物与T细胞受体-TCR/CD3复合物相结合,形成MHC-TCR-CD3复合体,进而传导信号至细胞内部,激活下游的信号通路,如钙调蛋白、MAPK、NF-κB等。这些信号通路的协同作用使T细胞从静止状态转变为增殖和活化状态,导致细胞迁移、细胞因子分泌等效应功能的增强。
第二个信号是共刺激信号,其中CD28是T细胞表面关键的共刺激受体之一,它为MHC-TCR信号提供了主要的辅助性激活信号。CD28的配体CD80(B7/BB1或B7-1)及CD86(B7-2)通过结合CD28,进一步增强由TCR/CD3复合体传递的信号,促使T细胞增殖并分泌IL-2、IL-4和IL-10等细胞因子,同时上调Bcl-xL的表达,以防止细胞凋亡。此过程通过与CD3信号的协同作用显著增强了T细胞的扩增与活化。
在体外激活与扩增T细胞时,必须提供持续而充分的激活信号。通过逆转录病毒载体转导CARcDNA也依赖于T细胞的活化,这过程需要T细胞受体(TCR/CD3)的主要特异性信号及共刺激信号(如CD28、4-1BB或OX40)的共同作用。根据活化方式的不同,T细胞活化可分为基于细胞的和基于抗体的两种类型。基于细胞的活化需要抗原呈递细胞如树突状细胞(DC)或人工抗原呈递细胞(AAPCs),而DC细胞的稳定性因人而异,此外生产和选择AAPCs也需要额外资源。
相比之下,抗CD3/CD28单克隆抗体通过靶向CD3/CD28分子外部结构,发挥激活T细胞的作用。可以利用抗CD3抗体提供第一个信号,抗CD28抗体提供共刺激信号,以此来有效活化和扩增T细胞。目前,在体外T细胞激活与扩增的主流选择中,主要采用相关刺激信号分子的抗体(如抗CD3/CD28抗体或抗CD3/CD28抗体包被的磁珠)进行T细胞的激活。
尊龙凯时推出的AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28(产品编号AC68969)是一种均匀的聚苯乙烯球形磁珠,具备可磁化和超顺磁性特点,这使得它们仅在磁场中具备磁性并且在移除磁场后能够轻松重新悬浮。通过在磁珠表面附着特异性抗体,能够直接从复杂的悬浮液(如血液)中捕获和分离完整的细胞,无需离心或色谱分离技术。通常,涂有特异性抗体的磁珠可用于分离或去除各种细胞类型,依赖于起始样品的属性、细胞表面标志物及相关下游应用进行阳性或阴性选择。
通过将磁珠与针对细胞表面活化分子抗体偶联,AcnoviaBeads能够高效分离和扩增T细胞。其产品AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28,能够与anti-human CD3和anti-human CD28抗体结合,实现T细胞的分选、富集和活化,非常实用。尊龙凯时产品的高效性能够极大简化T细胞在体外的分选和活化过程。
使用AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28(磁珠:细胞比例为3:1)成功分离并激活来自健康供体PBMC的CD3+ T细胞,显示出极高的分选效率。经过48小时培养,采用anti-human CD25-APC和anti-human CD69-PE进行荧光染色,并通过流式细胞术分析CD3+ T细胞的增殖与活率,充分证明了尊龙凯时这一产品的卓越性能。
综上所述,尊龙凯时的AcnoviaBeads Human T-Activator CD3/CD28是现代T细胞激活与扩增的有效工具,它的高效性和便捷性为生物医疗领域提供了重要的支持。