产品及特点

尊龙凯时推出的检测试剂盒基于探针法荧光定量PCR原理，具有以下显著特点：

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板即可进行检测。

2. 高灵敏度：引物及各组分经过优化，确保检测的灵敏度显著提高。

3. 阳性对照：本产品提供阳性对照，有助于区分假阴性样品，提高检测的准确性。

4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域，有效避免与其他生物样本DNA的交叉反应。

5. 多功能检测：本试剂盒既可用于定性检测，也适用于定量检测，定量时线性范围至少达到5个数量级。

6. 使用便捷：本产品可以支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应，简化实验流程。

7. 仅限科研使用：本产品仅供科研用途，不得用于临床诊断。

使用方法：

一、DNA提取（样本制备区）

采用自选方法提取并纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

由于阳性对照浓度较高，稀释操作应在独立区域进行以避免污染。

1. 标记6个离心管，分别为7、6、5、4、3、2。

2. 使用带芯枪头加入45μL DEPC-H2O于每个管中。

3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，充分震荡后得到标准曲线样品，放置冰上待用。

4. 重复以上操作以获得不同浓度的标准曲线样品，直至形成6个稀释度的样品。

三、试剂配制（试剂准备区）

准备N+2个qPCR管（N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照），向各PCR管中加入必要成分（请参阅详细说明书）。

四、添加模板（模板添加区）

向qPCR管中分别加入2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照，最后离心30秒并立即进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放置于扩增仪器样品槽中，执行扩增程序（请参见详细说明书）。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，绘制以阳性对照浓度的log值为横轴、Ct值为纵轴的标准曲线，根据待测样品的Ct值推算其DNA浓度的log值。

2. 若未制作标准曲线，阳性对照的Ct值应小于30，显示明显的指数增长，阴性对照应在Ct值38以上或无Ct值，而样本检测的结果应根据检测的Ct值做进一步判定。

运输及保存：尊龙凯时产品需采用低温运输，储存条件为-20℃，保存期限为一年。阳性对照应单独放置，避免污染其他试剂。