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尊龙凯时氨基酸脱羧酶试验培养基使用指南

发布时间:2025-07-31   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时在微生物检测领域的研究进展中,氨基酸脱羧酶的试验提供了新的生化特征鉴定手段。氨基酸脱羧酶是细菌为适应环境而进化的一种生理机制。当细菌在含有高浓度酸的发酵环境中生长受限时,它们会产生氨基酸脱羧酶,将氨基酸中的羧基去除,形成碱性胺类化合物以中和酸性环境。不同细菌产生的氨基酸脱羧酶种类各异,常见的有赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶,测定这些酶的活性可用于细菌的生化特性鉴定。

尊龙凯时氨基酸脱羧酶试验培养基使用指南

培养基配方中包含以下成分:
氨基酸脱羧酶试验管:
- 蛋白胨 5g/L
- 牛肉浸粉 3g/L
- 葡萄糖 1g/L
- 溴甲酚紫 0.02g/L
- 氨基酸(赖氨酸、鸟氨酸或精氨酸) 5g/L/pH 6.8±0.2
注:氨基酸应使用L型,若为DL混合型,需加倍使用量。

实验方法及原理:我们将待测菌株制备为约109 CFU/mL的悬液,接种50-100μL于氨基酸脱羧酶试验管和对照管中,并加无菌液体石蜡以隔绝空气,在36±1℃的适宜条件下培养。实验原理是:细菌在对照管中分解培养基内的葡萄糖,产生酸使pH下降,导致颜色从紫色变为黄色。在氨基酸脱羧酶试验管中,细菌同样会分解葡萄糖产酸,若其生成氨基酸脱羧酶,则会中和酸性环境使pH上升,颜色可能由黄变紫。相应地,观察到对照管与试验管均为黄色,表明氨基酸脱羧酶阴性;若对照管黄色而试验管紫色,则表示氨基酸脱羧酶阳性。

对照管的结果变黄,是由于细菌在厌氧条件下分解葡萄糖产生酸,造成pH降低,溴甲酚紫由紫色转变为黄色。根据对葡萄糖利用的方式,细菌可分为三种类型:发酵型细菌(例如大肠杆菌、沙门氏菌)、氧化型细菌(例如铜绿假单胞菌)和产碱型细菌(例如粪产碱杆菌)。仅发酵型细菌在厌氧条件下才能使氨基酸对照管变为黄色,而氧化型和产碱型细菌无法在这一条件下产生酸。

在实际应用时,如果对照管呈紫色,可能存在两种情况:一是细菌未能利用培养基中的糖和氨基酸,导致pH无变化,或只利用氨基酸;二是细菌分解葡萄糖产生酸后又生成碱。此时若对照管为黄色而试验管为紫色,则可确认氨基酸脱羧酶反应为阳性。

还需注意,若对照管仍为紫色,可能是氧化型或产碱型细菌,其氨基酸脱羧酶的阳性或阴性无法通过此方法确认。由此可见,只有在适用于实验的细菌上,才能准确评估其生化特性。

总之,利用尊龙凯时的氨基酸脱羧酶试验,我们可以高效地识别和确认细菌的类型及其生化特征,为微生物研究提供重要支持。